USO DA ESPECTROMETRIA PARA DETERMINAR A DENSIDADE CELULAR DAS ESPÉCIES DE MICROALGAS Chaetoceros muelleri E Nannochloropsis oculata, EM CULTIVO AXÊNICO

Resumo

Resumo: As microalgas são importantes organismos e de aplicação variada por conta das diferentes substâncias por elas sintetizadas, conferindo grande potencial biotecnológico e despertando muito interesse da comunidade científica nos últimos anos. Na aquicultura, constituem a base da cadeia trófica aquática, podendo ser usadas diretamente ou indiretamente na alimentação de larvas durante o cultivo de diferentes espécies aquáticas de interesse econômico. Uma das maneiras de acompanhar o desenvolvimento dos cultivos é através do estabelecimento da curva de crescimento, por meio da densidade celular, ou seja, da contagem diária do número de células microalgais encontradas em um volume específico, normalmente realizado com o uso de Câmara de Neubauer. Este procedimento no entanto pode levar a erros de contagem uma vez que depende da observação microscópica e está diretamente ligado a condição humana de estabelecer precisão, portanto, o uso de equipamentos de maior precisão é uma alternativa importante. Neste sentido, a densidade celular em dois cultivos microalgais foi determinada por espectrometria, durante um estudo realizado na sala de produção de fitoplâncton, no Laboratório de Limnologia da Universidade Federal da Fronteira Sul, campus Laranjeiras do Sul-PR, no âmbito da disciplina optativa Cultivo de Alimento Vivo. Os cultivos axênicos das espécies Chaetoceros muelleri e Nannochloropsis oculata foram conduzidos em erlenmeyers de 1,0 L a partir do inóculo de 100 mL (10%) retirados de cultura estoque de cada uma das espécies, em triplicata, contendo dois diferentes meios de cultura enriquecidos (F2 Guillard modificado e Adubo químico fosfatado moído - Heringer^®) como fonte de nutrientes N e P para a promoção do crescimento algal, totalizando 12 unidades experimentais, mantidas em condições controladas de temperatura, salinidade, luminosidade, aeração e pH. Uma amostra inicial de cada uma das cultura puras foi diluída sucessivamente (Cultura pura; 10^-1 ;10^-2 ;10^-3 e 10^-4) e usada para determinar a concentração celular em microscopia (microscópio óptico trinocular Olympus CX21^®) e tomada a leitura em espectrometria para observar a correlação da biomassa algal. As leituras foram realizadas em espectrômetro Thermo Cientific Evolution 201^®, entre 600 a 800 nm verificando os picos de absorção de luz. A partir da leitura da absorbância e da análise estatística dos dados no programa Microsoft Office Excel 2007^®, foram calculados os coeficientes de determinação (R²) em cada microalga estudada e estimada as retas de regressão, que expressam a relação entre a leitura da absorbância e a densidade celular estimada. Usando as fórmulas obtidas para cada microalga Chaetoceros muelleri (y= 871,49x-5,7796) e Nannochloropsis oculata (y= 3294,8x-680,67), a partir da análise estatística e, com as leituras diárias de absorbância, estabeleceu-se a curva de crescimento algal para estas espécies de microalgas neste estudo, em cada um dos meios de cultura usado, demonstrando ser a espectrometria, uma alternativa eficiente para estimar a densidade celular em cultivos microalgais.

Palavras-chave: fitoplâncton; crescimento algal; meios de cultura; espectrofotômetro.