BACTÉRIAS ESKAPE EM AMBIENTES VETERINÁRIOS

ISOLAMENTO, IDENTIFICAÇÃO E PERFIL DESUSCETIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS COM ÊNFASE EMQUINOLONAS

Resumo

O crescente processo de resistência antimicrobiana tem ultrapassado os esforços internacionais para conter a emergência dos patógenos resistentes a antimicrobianos, o que, até 2050, poderá resultar em 10 milhões de mortes de seres humanos anualmente. A aquisição de genes de resistência por patógenos ESKAPE – Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumanii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter spp. – merece atenção pelo perfil multirresistente da maior parte dos isolados. As quinolonas são consideradas fármacos de importância crítica tanto para humanos quanto animais. No entanto, relatos de resistência contra essa classe têm atingido níveis alarmantes mundialmente, colocando em risco a saúde das populações humana e animal. Portanto, o objetivo do presente estudo é isolar bactérias do grupo ESKAPE de ambientes veterinários e identificar os padrões de resistência a quinolonas expressos por esses patógenos. Para isso, serão incluídas superfícies, equipamentos, instrumentos e outros materiais considerados limpos e utilizados no manejo de animal, totalizando 50 coletas em clínica de pequenos animais e 50 coletas em fazenda de produção animal, ambos localizados no município de Realeza - Paraná. As amostras serão semeadas pela técnica de semeadura por esgotamento em Ágar Sangue (5% de sangue ovino) e ágar MacConkey e incubadas em aerobiose a 35°C ±1°C por até 72 horas. Será realizada a triagem dos cultivos, caracterização fenotípica segundo suas características morfo-tintoriais e bioquímicas e genotípica pela técnica de Maldi-Tof. Também será executada a técnica de disco-difusão para obtenção do perfil qualitativo de suscetibilidade a representantes de quinolonas da primeira, segunda, terceira e quarta gerações, bem como a mensuração da concentração inibitória mínima e concentração bactericida mínima para obtenção do perfil quantitativo. Para as bactérias resistentes, será realizada a pesquisa fenotípica de expressão de biofilme e bombas de efluxo, além de mutações nos genes gyrA e parC por meio da PCR convencional seguida de sequenciamento genético. A análise estatística será realizada pelo software GraphPad Prism^©. Uma análise descritiva será conduzida para determinar as medidas de tendência central e dispersão. A normalidade dos dados será avaliada pelo teste de Shapiro-Wilk. Os resultados de CIM e CBM serão submetidos à análise de variância (ANOVA) e teste post hoc de Tukey. As pesquisas de expressão de bombas de efluxo, formação de biofilme e presença de genes de resistência serão avaliados por método de prevalência. Em todas as análises, será adotado um nível de significância de p < 0,05. Desse modo, espera-se identificar padrões de resistência a quinolonas em bactérias do grupo ESKAPE isoladas de ambientes veterinários, fornecendo dados sobre a prevalência de resistência e os mecanismos envolvidos. Os resultados poderão contribuir para estratégias de manejo mais eficazes, mitigando a disseminação de resistência antimicrobiana em contextos clínicos e de produção animal.