IMPLEMENTAÇÃO E ADEQUAÇÃO DE DOIS PROTOCOLOS COM BIOMARCADORES PARA DESENVOLVIMENTO DE TESTES EM GENOTOXICIDADE AMBIENTAL COM CÉLULAS DE MUCOSA BUCAL: ETAPA 2.

Resumo

A exposição a xenobióticos ambientais pode ocasionar alterações no material genético, tornando necessária a utilização de biomarcadores para avaliação de danos celulares. O presente estudo teve como objetivo avaliar a aplicabilidade de células da mucosa bucal como material biológico para a implementação e adequação de protocolos de genotoxicidade ambiental, utilizando o Ensaio Cometa (SCGE) e o Teste de Micronúcleos (BMCyt). O protocolo do Ensaio Cometa foi adaptado a partir das metodologias propostas por Singh et al.(1988) e Thomas et al.(2009), originalmente desenvolvidas para diferentes tipos celulares, buscando estabelecer condições adequadas para a análise de danos ao DNA em células da mucosa bucal. Os resultados evidenciaram dificuldades relacionadas à elevada adesão das células epiteliais e formação de aglomerados, comprometendo a obtenção de núcleos isolados e ocasionando variabilidade na quantidade celular entre as amostras. Embora tenha sido possível observar alterações no material genético, nem todas as amostras apresentaram quantidade celular suficiente para uma análise confiável. Portanto, o protocolo ainda não apresenta robustez e repetibilidade suficientes para sua aplicação. Como perspectiva propõe-se a adequação do isolamento de linfócitos presentes na mucosa bucal, visando aprimorar a aplicação do Ensaio Cometa e sua utilização conjunta ao BMCyt em estudos de biomonitoramento ambiental.