ACHADOS CLÍNICOS E HISTÓRICO DE DOENÇAS EM VACAS COM LEUCOSE ENZOÓTICA BOVINA.
Palavras-chave:
Diagnóstico molecular; ELISA; qPCRResumo
Realizamos testes diagnósticos em oito novilhas mantidas na UFFS-Campus Realeza, as quais apresentavam as análises clínicas consolidadas. A testagem pelo método diagnóstico ELISA foi realizada pelo grupo de pesquisa utilizando protocolo estabelecido em subprojeto associado, com o Kit “Enzootic Bovine Leukosis Virus (BLV) gp51 Antibody Test” da Idexx, no equipamento Thermo Scientific Multiskan Sky e Thermo Scientific Wellwash Versa.
Considerando os mesmos animais, as alíquotas das amostras foram processadas para realização da qPCR. A extração do material genético das amostras foi obtida no laboratório de biologia molecular do SUHVU utilizando o kit Biospin Virus DNA/RNA Extraction Kit (Bioflux). O equipamento adotado para as reações moleculares foi o termociclador PTC-200, MJ Research Chromo 4, seguindo o protocolo: incubação inicial e ativação da polimerase à 95 ºC (15 minutos), desnaturação à 94 ºC (60 segundos), anelamento à 60 ºC (60 segundos), por 50 ciclos.
Quanto à aplicabilidade do teste qPCR em rotinas de diagnóstico, novas investigações serão necessárias para validação rigorosa do método molecular e para garantir que o diagnóstico da leucose enzoótica bovina seja confiável e reprodutível.
Assim, propõe-se ampliar o número de animais, realizar coletas em diferentes estágios e executar o refinamento dos protocolos.
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