AVALIAÇÃO DO EFEITO DO 1α,25-DIIDROXI-VITAMINA D SOBRE AS LINHAGENS CELULARES SK-Mel-28 E A375

Resumo

1 Introdução

O melanoma cutâneo é uma neoplasia maligna, que se origina de melanócitos ou de células precursoras dos mesmos, e que tem alto potencial de metastatização. Existem diversas evidências epidemiológicas de que a radiação solar está relacionada à sua carcinogênese. O receptor de vitamina D (VDR) está presente em melanócitos normais e em determinadas linhagens celulares de melanoma. A 25-hidroxivitamina D, também chamada colecalciferol, é normalmente formada na pele a partir de 7-deidrocolesterol, em uma reação fotoquímica catalisada pelo componente ultravioleta da luz solar (OLIVEIRA FILHO et al., 2014). A vitamina D3 não é biologicamente ativa, mas convertida por enzimas do fígado e dos rins em 1,25-diidroxicolecalciferol (vitamina D ou calcitriol), um hormônio que regula a absorção de cálcio nos intestinos, os níveis deste nos rins e nos ossos, a resposta imune inata, a proliferação e diferenciação celular. Alguns estudos relataram relação entre a 1α,25-diidroxi e sua ação antitumoral celular (BAGATINI et al., 2019). Assim, para analisar a vitamina D3 em células são necessários alguns mecanismos como por exemplo mensurar a expressão proteica da CD73 -cluster of differentiation 73- um antígeno encontrado na membrana de leucócitos, a fim de saber se apresenta ação antitumoral devido a metabolização da adenosina (MÂNICA et al., 2019).

2 Objetivos

Esse estudo tem o objetivo de avaliar a expressão proteica da CD73 sobre dois modelos de linhagens células melanômicas (SK-MEL-28 e A375) e quantificar essa expressão a fim de chegar a um denominador relevante para os moldes metodológicos científicos.

3 Metodologia

A partir de um estudo experimental in vitro, células de melanoma foram cultivadas e tratadas com concentrações de 1, 10 e 50 nM  da 1α,25-diidroxi durante 24h e 48 h seguido da determinação dq CD73. O MTT foi utilizado para avaliar a viabilidade celular. A linhagem celular de melanoma humano utilizada foi a  SK-Mel-28 e A375, compradas no banco de células do Rio de Janeiro e armazenadas/cultivadas em laboratório de cultivo celular da Universidade da Fronteira Sul. Foi realizado análise da porcentagem de células e da Intensidade Mediana de Fluorescência (MFI) presente na citometria de fluxo.

4 Resultados e Discussão

            Os resultados mostram que a 1α,25-diidroxi foi capaz de diminuir a expressão proteica da CD73. Ao analisar MFI em todas as concentrações testadas a concentração de 50nM foi que obteve a maior redução, corroborando para um maior intervalo de medição, isto é maior índice terapêutico. Por ter sido utilizadas duas linhagens diferentes de melanoma a sensibilidade estatística do estudo aumentou.

5 Conclusão

Muitas evidências inéditas indicam que a 1α,25-diidroxi tem um papel protetor em modelos de melanoma cutâneo, além do controle na produção de adenosina através da modulação do sistema purinérgico. Este estudo fornece informações originais que a 1α,25-diidroxi tem uma importante função na regulação do tumor e uma possível perspectiva terapêutica. Por fim, são necessários mais estudos científicos para elucidar esse achado.

Referências Bibliográficas

BAGATINI, M. D. et al. 1α, 25-Dihydroxyvitamin D3 alters ectonucleotidase expression and activity in human cutaneous melanoma cells. Journal of Cellular Biochemistry, v. 120, n. 6, p. 9992–10000, jun. 2019.

MÂNICA, A. et al. The signaling effects of ATP on melanoma-like skin cancer. Cellular Signalling, v. 59, p. 122–130, jul. 2019.

OLIVEIRA FILHO, R. S. DE et al. Nível sérico de vitamina D3 em portadores de melanoma cutâneo. einstein (São Paulo), v. 12, p. 473–476, dez. 2014.

Palavras-chave: Vitamina D. Melanoma cutâneo. Terapêutica. Sistema Purinérgico

Nº de Registro no sistema Prisma: PES-2022-0228

Financiamento

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