A VITAMINA D DIMINUI A EXPRESSÃO E A ATIVIDADE DA ECTO-5'-NUCLEOTIDASE EM CÉLULAS SK-MEL-28

Julia Leao Batista Simoes; Margarete Dulce Bagatini; Geórgia de Carvalho Braga; Filomena Marafo

Julia Leao Batista Simoes UFFS
Margarete Dulce Bagatini, Dra Universidade Federal da Fronteira Sul https://orcid.org/0000-0001-9263-4980
Geórgia de Carvalho Braga Universidade Federal da Fronteira Sul https://orcid.org/0000-0003-0384-9934
Filomena Marafo, Me Universidade Federal da Fronteira Sul https://orcid.org/0000-0001-9167-0146

Abstract

Introdução: Recentemente, a vitamina D tem sido visada na terapêutica do cancro, mais especificamente, do melanoma, uma vez que níveis reduzidos dessa vitamina têm sido associados a desfechos negativos, na literatura, indica-se que a deficiência sérica de 25(OH)D3, o precursor da forma ativa da vitamina D, está atrelada ao aumento da incidência e a pior prognóstico do melanoma. Nossa hipótese é que a vitamina D diminui as taxas de formação de adenosina em células de melanoma cutâneo humano através da inibição da quebra de ATP extracelular, afetando assim a viabilidade das células tumorais. Objetivos: Verificar os mecanismos de ação da 1,25(OH)2D3 sobre a atividade e expressão de ectonucleotidases em células de melanoma cutâneo. Metodologia: A partir de um estudo experimental in vitro, a linhagem celular de melanoma humano, SK-Mel-28, foi cultivada e tratada com concentrações de 1-50 nM do metabólito ativo da vitamina D (1,25(OH)2D3) durante 24h seguido pela determinação de NTPDase/CD39 e ecto- atividade da 5'-nucleotidase/CD73 e também das taxas de expressão do NTPASE1, NT5E e adenosina desaminase relacionados ao sistema purinérgico e receptor de vitamina D. O MTT foi utilizado para avaliar a viabilidade celular. Resultados e Discussão: Os resultados mostram que 1,25(OH)2D3 foi capaz de diminuir a hidrólise de AMP pela ecto-5'-nucleotidase/CD73 e expressão de CD73, enquanto não altera a atividade de NTPDase/CD39, mas aumenta a expressão de CD39. Também foi observado um aumento da viabilidade celular na concentração 1nM, mas esta viabilidade diminuiu à medida que as concentrações do metabólito ativo da vitamina D foram aumentadas para 50nM. Não foram observadas diferenças na expressão dos genes. Conclusões/Considerações finais: Mostramos pela primeira vez um mecanismo de controle na produção de adenosina através da modulação do sistema purinérgico em células de melanoma cutâneo tratadas com o metabólito ativo da vitamina D. Este estudo fornece informações originais sobre os mecanismos pelos quais a vitamina D desempenha um papel fundamental na prevenção da progressão tumoral em células de melanoma humano.